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      蘇木素-伊紅染色試劑盒的使用說明

      發表時間:2022-06-22  |  點擊率:147
        蘇木素是一種有機物,化學式為C16H14O6,為褐色結晶粉末,用作核和染色質的染色劑。用于光度法測定釩、鋁、錫(IV)、氟、鈮、鉭等。
       
        蘇木素和伊紅在組織學上被經常使用,與碘液不同,這是一種染色劑。其他常用的含有蘇木素的染色劑有磷鎢酸蘇木素染色劑,也就是磷鎢酸與蘇木素的混合物。蘇木素染色劑經常為組織的研究使用。 明礬和三價鐵鹽常常被用作媒染劑,展示核和細胞質結構。這些媒染劑的原理都是形成媒染劑-染料-組織復合體,從而顯示顏色。使用的鹽不同顏色也不同: 當用鐵鹽呈現深藍色顏色沉淀,用鋁鹽通常顯示藍白色。下面分別介紹鋁蘇木素溶液和鐵蘇木素溶液。
       
        蘇木素-伊紅染色試劑盒使用說明:
       
        1. 樣品處理
       
        a) 對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘,換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘,無水乙醇5分鐘,90%乙醇2分鐘,70%乙醇2分鐘,蒸餾水2分鐘。
       
        b) 對于冰凍切片:經固定的切片置蒸餾水2分鐘。
       
        c) 對于培養細胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上,蒸餾水洗滌2分鐘,換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2分鐘。
       
        2. 蘇木素-伊紅染色
       
        a) 對于上述處理好的樣品,用蘇木素染色5-10分鐘(可以根據染色結果和要求調整時間),回收染色液后,用自來水沖洗去除殘留的染色液,
       
        b) 藍化和分色:用自來水沖洗,待切片變成藍色后,再用含0.5~1%鹽酸的70%酒精溶液進行分色,脫去多余的染料(因為蘇木精染色后,細胞核著色較深,細胞質及結締組織纖維等亦稍著色,影響下步染色及觀察)。然后再用自來水沖洗,使之藍化,需5~10分鐘。
       
        c) 伊紅染色:切片用蒸餾水浸洗后,放入1%伊紅水溶液,浸染5~10分鐘。
       
        d) 脫水:將切片用蒸餾水洗去附在載玻片上的染液后,經70%、80%、90%酒精分色及脫水,再經95%酒精和2次無水酒精脫水,每級一般為2分鐘。
       
        e) 透明:切片入二甲苯2次,每次2分鐘。
       
        f) 封固:從二甲苯中取出切片,在切片的組織上滴加適量樹膠,上面再加一蓋玻片, 使樹膠布滿于蓋玻片與載玻片之間的間隙,封固即告完成。將封好的切片標本放入烤箱,待蓋玻片粘著牢固后,即獲得可供長期觀察和保存的H·E染色標本。
       
        3. 進行其它染色
       
        如果進行免疫熒光染色,伊紅染色液染色后,70%乙醇洗滌2次,每次2分鐘,再用PBS或生理鹽水、TBS、TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘,然后就可以進行免疫熒光染色或其它的染色。
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